สามารถใช้เวิร์กสเตชันคู่มือ PCR หรือ QPCR สำหรับร้อน - เริ่ม PCR ได้หรือไม่?

ในฐานะซัพพลายเออร์ของเวิร์กสเตชันคู่มือ PCR หรือ QPCR ฉันมักจะพบคำถามจากลูกค้าเกี่ยวกับความเก่งกาจของผลิตภัณฑ์ของเรา แบบสอบถามทั่วไปอย่างหนึ่งคือไม่ว่าจะใช้เวิร์กสเตชัน PCR หรือ QPCR ด้วยตนเองสำหรับ Hot - Start PCR หรือไม่ ในโพสต์บล็อกนี้ฉันจะเจาะลึกลงไปในรายละเอียดของ Hot - Start PCR วิธีการใช้เวิร์กสเตชันของเราในกระบวนการนี้และประโยชน์ที่พวกเขานำมาใช้

ทำความเข้าใจร้อน - เริ่ม PCR

Hot - Start PCR เป็นเทคนิคที่ออกแบบมาเพื่อเพิ่มความจำเพาะของปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) ใน PCR แบบดั้งเดิม TAQ DNA polymerase สามารถใช้งานได้ที่อุณหภูมิห้องซึ่งนำไปสู่การก่อตัวของผลิตภัณฑ์ไพรเมอร์ที่ไม่เฉพาะเจาะจงและการขยายพื้นหลัง ผลิตภัณฑ์ที่ไม่เฉพาะเจาะจงเหล่านี้สามารถแข่งขันกับ DNA เป้าหมายสำหรับส่วนประกอบปฏิกิริยาลดประสิทธิภาพของการขยายส่วนดีเอ็นเอที่ต้องการ

Hot - Start PCR เอาชนะปัญหานี้ได้โดยป้องกันไม่ให้โพลีเมอเรสไม่ทำงานจนกระทั่งส่วนผสมของปฏิกิริยาถึงอุณหภูมิสูง สิ่งนี้สามารถทำได้ด้วยวิธีการต่าง ๆ เช่นการใช้พอลิเมอร์ TAQ ที่ปรับเปลี่ยนทางเคมีที่เปิดใช้งานเฉพาะที่อุณหภูมิสูงหรือโดยการแยกส่วนประกอบปฏิกิริยาทางร่างกายจนกว่าจะถึงขั้นตอนอุณหภูมิสูง

คุณสมบัติของเวิร์กสเตชันคู่มือ PCR หรือ QPCR

เวิร์กสเตชันคู่มือ PCR หรือ QPCR ของเราติดตั้งคุณสมบัติที่หลากหลายซึ่งทำให้เหมาะสำหรับ PCR ที่ร้อนแรง - เริ่มต้น ประการแรกพวกเขามีความสามารถในการปิเปตที่แม่นยำ การวัดที่แม่นยำและการถ่ายโอนของรีเอเจนต์มีความสำคัญอย่างยิ่งใน Hot - Start PCR เนื่องจากการเปลี่ยนแปลงเล็กน้อยในปริมาตรของไพรเมอร์, DNA เทมเพลตหรือโพลีเมอเรสอาจส่งผลกระทบต่อผลลัพธ์ของปฏิกิริยา เวิร์กสเตชันของเราอนุญาตให้มีการปิเปตที่แม่นยำสูงเพื่อให้มั่นใจว่าส่วนประกอบปฏิกิริยาจะถูกเพิ่มในสัดส่วนที่ถูกต้อง

ประการที่สองเวิร์กสเตชันเหล่านี้ให้สภาพแวดล้อมที่ควบคุมสำหรับการเตรียมตัวอย่าง การปนเปื้อนเป็นข้อกังวลสำคัญใน PCR โดยเฉพาะอย่างยิ่งใน PCR ที่ร้อนแรง - ซึ่งปฏิกิริยามีความไวสูง เวิร์กสเตชันของเราได้รับการออกแบบด้วยคุณสมบัติเช่น hoods flow laminar และตัวเลือกการทำหมัน UV เพื่อลดความเสี่ยงของการปนเปื้อน สิ่งนี้จะช่วยให้มั่นใจในความน่าเชื่อถือและความสามารถในการทำซ้ำของผลลัพธ์ PCR ที่ร้อนแรง

การใช้เวิร์กสเตชันคู่มือ PCR หรือ QPCR สำหรับ HOT - เริ่ม PCR

กระบวนการใช้เวิร์กสเตชันคู่มือ PCR หรือ QPCR ของเราสำหรับ Hot - เริ่มต้น PCR เริ่มต้นด้วยตัวอย่างและการเตรียมรีเอเจนต์ เวิร์กสเตชันช่วยให้การปิเปตที่ง่ายและมีประสิทธิภาพของส่วนประกอบปฏิกิริยารวมถึง DNA เทมเพลต, ไพรเมอร์, DNTPS, บัฟเฟอร์และฮอต - เริ่ม TAQ polymerase ผู้ใช้สามารถวัดและถ่ายโอนแต่ละส่วนประกอบลงในหลอดหรือเพลตได้อย่างแม่นยำ

เมื่อมีการเพิ่มส่วนประกอบปฏิกิริยาตัวอย่างสามารถถ่ายโอนไปยังเครื่องปั่นไฟความร้อนสำหรับการขยาย PCR เวิร์กสเตชันของเราเข้ากันได้กับนักปั่นความร้อนที่หลากหลายทำให้มั่นใจได้ว่าการรวมเข้ากับเวิร์กโฟลว์ PCR โดยรวมอย่างราบรื่น

ในระหว่างกระบวนการ PCR คุณลักษณะเริ่มต้นที่ร้อนแรงของ TAQ polymerase ทำให้มั่นใจได้ว่าปฏิกิริยาจะเริ่มขึ้นก็ต่อเมื่ออุณหภูมิถึงระดับที่เหมาะสม นักปั่นความร้อนจากนั้นจะวนผ่านขั้นตอนการตกตะกอนการหลอมและขั้นตอนการขยายเพื่อขยาย DNA เป้าหมาย

ข้อดีของการใช้เวิร์กสเตชันของเราสำหรับ HOT - เริ่ม PCR

มีข้อดีหลายประการในการใช้เวิร์กสเตชัน PCR หรือ QPCR ของเราสำหรับ Workstations สำหรับ Hot - Start PCR หนึ่งในประโยชน์หลักคือการปรับปรุงประสิทธิภาพ ความสามารถในการปิเปตที่แม่นยำของเวิร์กสเตชันช่วยลดโอกาสของข้อผิดพลาดในการเพิ่มรีเอเจนต์ซึ่งนำไปสู่ผลลัพธ์ PCR ที่สอดคล้องและเชื่อถือได้มากขึ้น สิ่งนี้สามารถประหยัดเวลาและทรัพยากรได้โดยลดความจำเป็นในการทดลองซ้ำ ๆ

ข้อได้เปรียบอีกประการหนึ่งคือการปรับปรุงความจำเพาะ ด้วยการลดการปนเปื้อนและสร้างความมั่นใจว่าการเพิ่มรีเอเจนต์ที่แม่นยำเวิร์กสเตชันของเราช่วยปรับปรุงความจำเพาะของปฏิกิริยา PCR ที่ร้อนแรง - เริ่มต้น ซึ่งหมายความว่าชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่ต้องการนั้นได้รับการขยายอย่างมีประสิทธิภาพมากขึ้นโดยมีสัญญาณรบกวนพื้นหลังน้อยลงจากผลิตภัณฑ์ที่ไม่ใช่เฉพาะ

นอกจากนี้เวิร์กสเตชันของเราเป็นผู้ใช้ - เป็นมิตรและใช้งานง่าย พวกเขามาพร้อมกับซอฟต์แวร์ที่ใช้งานง่ายและการออกแบบตามหลักสรีรศาสตร์ทำให้เหมาะสำหรับทั้งนักวิจัยที่มีประสบการณ์และเทคนิค PCR ใหม่

เปรียบเทียบกับเวิร์กสเตชันอื่น ๆ

เมื่อเปรียบเทียบกับเวิร์กสเตชันอื่น ๆ ในตลาด PCR หรือ QPCR Manual Workstations โดดเด่นสำหรับคุณภาพและประสิทธิภาพของพวกเขา ตัวอย่างเช่นเมื่อเทียบกับเวิร์กสเตชันคู่มือ ELISAเวิร์กสเตชันคู่มือ ELISAซึ่งส่วนใหญ่ได้รับการออกแบบมาสำหรับการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์เวิร์กสเตชันของเราได้รับการปรับให้เหมาะสมสำหรับแอปพลิเคชัน PCR โดยเฉพาะ พวกเขามีการควบคุมอุณหภูมิที่แม่นยำยิ่งขึ้นและความแม่นยำในการปิเปตซึ่งจำเป็นสำหรับ PCR เริ่มร้อน - เริ่มต้น

ในทำนองเดียวกันในขณะที่เวิร์กสเตชันของ Liquid Handlerเวิร์กสเตชัน Handler Liquidสามารถจัดการกับงานการถ่ายโอนของเหลวที่หลากหลายเวิร์กสเตชัน PCR หรือ QPCR ของเรานั้นมุ่งเน้นไปที่ข้อกำหนดเฉพาะของ PCR เช่นการผสมรีเอเจนต์ที่แม่นยำและการปนเปื้อนที่ลดลงในระหว่างการเตรียมปฏิกิริยา PCR เริ่มร้อน

เวิร์กสเตชัน Pipetting 96 Microplate96 Microplate Pipetting Workstationเป็นอีกทางเลือกหนึ่งในตลาด อย่างไรก็ตามเวิร์กสเตชันของเรามีความยืดหยุ่นมากขึ้นในแง่ของประเภทของหลอดและเพลตที่สามารถใช้งานได้รวมถึงคุณสมบัติเพิ่มเติมสำหรับการควบคุมการปนเปื้อนซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับ PCR เริ่มร้อน

กรณีศึกษา

เพื่อแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพของเวิร์กสเตชันคู่มือ PCR หรือ QPCR ของเราใน Hot - เริ่ม PCR ลองดูกรณีศึกษาสองสามกรณี ในห้องปฏิบัติการวิจัยที่ศึกษาการแสดงออกของยีนพวกเขาใช้ PCR เริ่มร้อนเพื่อขยายยีนที่เฉพาะเจาะจงจากส่วนผสมที่ซับซ้อนของตัวอย่าง DNA ก่อนที่จะใช้เวิร์กสเตชันของเราพวกเขากำลังประสบปัญหาเกี่ยวกับการขยายที่ไม่เฉพาะเจาะจงและผลลัพธ์ที่ไม่สอดคล้องกัน

หลังจากเปลี่ยนไปใช้เวิร์กสเตชันคู่มือ PCR หรือ QPCR ของเราพวกเขาสังเกตเห็นการปรับปรุงที่สำคัญในความจำเพาะของปฏิกิริยา PCR คุณสมบัติการควบคุมปิเปตและการปนเปื้อนที่แม่นยำของเวิร์กสเตชันช่วยลดเสียงรบกวนพื้นหลังและเพิ่มผลผลิตของชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่ต้องการ สิ่งนี้ทำให้พวกเขาได้รับข้อมูลการแสดงออกของยีนที่แม่นยำและเชื่อถือได้มากขึ้น

ในอีกกรณีหนึ่งห้องปฏิบัติการวินิจฉัยกำลังใช้ PCR เริ่มร้อนสำหรับการตรวจจับเชื้อโรค ห้องปฏิบัติการจำเป็นต้องประมวลผลตัวอย่างจำนวนมากอย่างรวดเร็วและแม่นยำ ความสามารถในการรับส่งข้อมูลที่สูงของเวิร์กสเตชันของเราและความสะดวกในการใช้งานทำให้พวกเขาสามารถปรับปรุงเวิร์กโฟลว์ของพวกเขาได้ พวกเขาสามารถเตรียมปฏิกิริยา PCR ได้อย่างมีประสิทธิภาพมากขึ้นนำไปสู่เวลาตอบสนองที่เร็วขึ้นสำหรับการตรวจจับเชื้อโรค

บทสรุป

โดยสรุปเวิร์กสเตชันคู่มือ PCR หรือ QPCR สามารถใช้สำหรับ Hot - Start PCR ได้อย่างแน่นอน เวิร์กสเตชันของเรานำเสนอคุณสมบัติที่จำเป็นเช่นการปิเปตที่แม่นยำการควบคุมการปนเปื้อนและความเข้ากันได้กับนักหมุนความร้อนเพื่อให้แน่ใจว่าความสำเร็จของปฏิกิริยา PCR เริ่มร้อน ข้อดีของการใช้เวิร์กสเตชันของเรารวมถึงประสิทธิภาพที่ดีขึ้นความจำเพาะที่เพิ่มขึ้นและความเป็นมิตรของผู้ใช้ทำให้พวกเขาเป็นเครื่องมือที่มีค่าสำหรับนักวิจัยและห้องปฏิบัติการที่เกี่ยวข้องกับแอปพลิเคชันที่ใช้ PCR

หากคุณมีความสนใจในการเรียนรู้เพิ่มเติมเกี่ยวกับวิธีการทำงานของ PCR หรือ QPCR Manual Workstations ของเราจะเป็นประโยชน์ต่อการทดลอง PCR ของคุณ - เริ่มต้นการทดลอง PCR เราขอแนะนำให้คุณติดต่อเราเพื่อการอภิปรายเพิ่มเติมและการจัดซื้อที่มีศักยภาพ ทีมผู้เชี่ยวชาญของเราพร้อมที่จะช่วยเหลือคุณในการค้นหาทางออกที่ดีที่สุดสำหรับความต้องการเฉพาะของคุณ

การอ้างอิง

1. Dieffenbach, CW, & Dveksler, GS (บรรณาธิการ) (2003) ไพรเมอร์ PCR: คู่มือห้องปฏิบัติการ สำนักพิมพ์ห้องปฏิบัติการ Cold Spring Harbour
2. Saiki, RK, Gelfand, DH, Stoffel, S. , Scharf, SJ, Higuchi, R. , Horn, Gt, ... & Mullis, KB (1988) ไพรเมอร์ - การขยายเอนไซม์โดยตรงของ DNA ด้วย DNA polymerase วิทยาศาสตร์, 239 (4839), 487 - 491